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细胞培养基分裂指数测定操作步骤与注意事项

点击次数:936 更新时间:2014-07-29
 

细胞培养基分裂指数测定操作步骤与注意事项

操作步骤

  1、消化细胞,将细胞培养基悬液接至内含盖玻片的培养皿中。

  2、CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上。

  3、取出盖片,按下列顺序操作:

  PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。

  4、盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检。

  5、计算:

  分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×*

NOV  Protein Cynomolgus 培养基重组食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)
IGFBP5  Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)
IGFBP5  Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 标签)
NOV  Protein Canine 重组狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)
IGFBP3  Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 标签)
IGFBP4  Protein Cynomolgus 培养基重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 标签)
IGFBP2  Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 标签)
IGFBP1  Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 标签)
IGF1  Protein Human 重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白
IGFBP7  Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)
IGFBP7  Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)
IGFBP7  Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 标签)
IGFBP6  Protein Human 重组人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 标签)
IGFBP6  Protein Mouse 培养基重组小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 标签)
IGF2BP2  Protein Human 重组人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 标签)
NOV  Protein Human 重组人 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)
WISP1  Protein Human 重组人 CCN4 / WISP1 蛋白 (His 标签)
IGFBP4  Protein Mouse 重组小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 标签)
IGFBP4  Protein Human 重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签)
IGFBP3  Protein Human 重组人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 标签)

  注意事项

  操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞培养基脱落。

  附:Giemsa染液配制:

  称Giemsa粉末0.5克,加几滴甘油研磨,再加入甘油(使加入的甘油总量为33ml)。56℃中保温90—120分钟。加入33ml甲醇,置棕色瓶中保存,此为Giemsa原液。

  使用时按要求用PBS稀释。一般稀释10倍。

 
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