避免PCR产物反复冻融,有效的方法是?按单次使用量分装保存?。将PCR产物分装到低吸附离心管中,每管预留10%体积,标记好日期和浓度,采用“先存先用"原则。这样每次只需取用所需量,避免反复冻融整个样本。
?其他关键措施包括:?
?添加?;ぜ?:在PCR产物中加入5%-10%甘油或0.1mM EDTA,能缓冲冻融过程中的物理损伤并抑制核酸酶活性。
?优化保存温度?:短期存放(1-2天内)可置于4℃;长期保存(数月)应置于-80℃。若需频繁使用,可短期存放于4℃(不超过72小时)。
?严格质量控制?:每次冻融后建议通过电泳检测完整性,若出现条带弥散或OD260/280比值异常(>1.9),需重新扩增样本。
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第17年